为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进一步降解,分析片段大小.下列是某小组进行的相关实验.
第一步水解 | 产物(单位:bp) | 第二步水解 | 产物(单位:bp) |
2 100 | 第一步水解产物分离后,1 900 200 | ||
1 400 | 800 600 | ||
1 000 | 1 000 | ||
500 | 500 | ||
2 500 | 将第一步水解产物分离后,1 900 600 | ||
1 300 | 800 500 | ||
1 200 | 1 000 200 | ||
经A酶和B酶同时切割 | 1 900 1 000 800 600 500 200
(2)由实验可知,在这段已知序列DNA分子上,A酶和B酶的识别位点分别为______个和______个.
(3)根据表中数据,请在图1中标出相应限制性酶的酶切位点.
(4)已知BamH 与BglⅡ的识别序列及切割位点如图2所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamHⅠ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后和______序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化______键的形成.
(5)一个基因表达载体的组成除了目的基因外,还必须有______、______及标记基因.
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