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如何终止胃蛋白酶继续酶解蛋白质我的试验是利用胃蛋白酶不易酶解β-乳球蛋白的原理,用胃蛋白酶酶解乳清粉,从而分离β-乳球蛋白.在做时间单因素试验时需要及时终止胃蛋白酶的反应,而且
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更新时间:2024-04-27 07:08:18
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如何终止胃蛋白酶继续酶解蛋白质

我的试验是利用胃蛋白酶不易酶解β-乳球蛋白的原理,用胃蛋白酶酶解乳清粉,从而分离β-乳球蛋白.在做时间单因素试验时需要及时终止胃蛋白酶的反应,而且不能让β-乳球蛋白变性,有什么好的方法?

孙明回答:
  胃蛋白酶与β-乳球蛋白在分子量上会存在差异,可以尝试利用这个原理设计分离方法.如果用于小剂量分析,可以使用离心法,如果分子量差异较小且实验条件允许,可尝试密度梯度离心,分辨效果很好.如果要处理较大量样品,建议...
孙明回答:
  如果重点放在胃蛋白酶失活的话,则我建议您尝试利用调pH的方法来处理。因为,β-乳球蛋白是鲜奶当中的一种蛋白质组分,而鲜奶是偏碱性的食物,pH7点几具体记不起了但应不会超过7点2、3;同时胃蛋白酶的最适pH在1.9左右并且在中性或碱性pH值的溶液中会发生解链而丧失活性。所以可以试一下将体系pH调至7或略高于7。(这跟人体肠道情况有些类似,胃内pH2左右,胃蛋白酶原被激活,胃蛋白酶反应条件最适,道十二指肠处与胰液中的NaHCO3混合,pH增至8附近,胃蛋白酶失活,胰蛋白酶最适)
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