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关于分子生物学的就行
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更新时间:2024-04-25 08:11:33
问题描述:

关于分子生物学的就行

康仲生回答:
  简答题:1.PleasedivideeukaryoticDNAintodifferentclassesaccordingtotheircomplexinganddescribetheirproperties.根据复杂性将真核DNA分成不同种类,并描述其特性.答:三种类型:1.高拷贝数,低cot值的高度重复序列.2.单拷贝数,高cot值的非重复序列.3.处于他们之间的中度重复序列.特点:1.占DNA总量10%左右,可分为三类:卫星DNA,小卫星DNA,微卫星DNA.2.占DNA总量20%~80%,可分为可编码序列和非编码序列.3.大多数结构基因及单拷贝序列.基因组中,单拷贝序列中储存了巨大的遗传信息,编码各种不同功能的蛋白质.2.Pleasedescribetheprocessesofreversetranscriptionandintegrationofretrovirus.请描述逆转录和逆转录病毒整合的过程.答:逆转录分为两步,第一步是在逆转录酶作用下,以RNA为模板合成到DNA负链的过程.宿主的空载tRNA会出现在病毒颗粒中,tRNA的3’端的18bp序列能与病毒RNA分子距5’端约100~200bp的一个位点进行碱基配对.到达末端时,合成暂时停下来.5’端R区被降解,使得3’端R区与新合成的DNA碱基能够配对,然后反转录酶将整个RNA从3’端开始转录成DNA.模板转换和延伸的结果是在5’端加入一个U3序列形成第一个LTR.第二步是以DNA负链为模板合成DNA正链的过程.首先是tRNA引物被降解,然后RNA被降解,剩余的片段作DNA合成的引物.整合到宿主DNA过程即是线性DNA到原病毒过程.主要是由整合酶所催化.3.PleasedescribestructsandfunctionsofDNAPolIandPolII.请描述DNA聚合酶I和II的结构和功能.答:PolI是单亚基蛋白,由PolA基因所编码,分子量是10万,除了具有合成DNA的能力外,还具有3’5’核酸外切酶活性和5’3’核酸外切酶活性.它的主要功能是DNA修复和在DNA复制过程中将RNA引物切除.PolII具有DNA聚合酶活性和3’5’核酸外切酶活性,但不具有5’3’核酸外切酶活性.主要功能是DNA修复.4.PleasedescribeDNAreplicationinitiationinprokaryotic.请描述原核生物中DNA复制的启动.答:首先是DnaA蛋白去寻找复制起始位点,它能够识别并结合在OriC的9bp重复序列上,一旦这四个重复序列被占满了,20多个额外的DnaA就会以协同作用的方式与OriC结合形成initialcomplex.接着DnaA使得起始位点左侧的3个富含AT的重复序列的两条链解开,形成opencomplex.这是在DnaC的帮助下,DnaB以六聚体的形式结合到这个open起始位点上,形成pre-primingcomplex,DnaB是解旋酶,它能够在Gyrase的帮助下,将DNA双链进一步解开,所形成的DNA单恋迅速被SSB四聚体结合,防止DNA链重新结合.然后,在其他蛋白的帮助下,具有产生RNA引物功能的引物酶也结合上去,形成引发体primosome,然后以DNA为模板,分别在先导链和滞后链上合成出RNA引物出来.一旦引物合成出来,引物酶就脱落下来,等待下一次的结合.然后DNA聚合酶III结合到复制叉上,将第一个dNTP接到RNA引物的3-OH上,起始过程就结束了.5.Pleasedescriberolesmechanismandprocessofmismatchrepair.请描述错配修复的作用,机制和过程.答:DNA复制保持低错误率的一个方面是来自于错配修复.错配修复是依靠甲基化状态的不同,对DNA复制后的亲代和子代DNA链进行区分,然后以母链为模板,对子链中错配的碱基进行更正的修复系统.在DNA甲基化前,修复系统对DNA进行巡查,当错配的碱基被识别时,相应的酶总是从非甲基化链去除和置换核苷酸,确保恢复最初的碱基对.错配修复机制检查无误后,新和成的子链也被甲基化,就如贴上一个合格标签一样.6.Pleasedescribemechanismprocessandconsequenceoftranscnl7.Featuresofintronsineukaryoticpre-tRNAandpre-rRNA,howtoremovethem?真核前体tRNA和前体rRNA中内含子的特点,怎样移除他们?答:前体rRNA属于I型自我剪接内含子,可以在没有酶的催化条件下,自行进行RNA剪接,从RNA前体上将自己切除,它是通过两步转酯反应将自身切除.第一步中鸟嘌呤核苷酸作为辅因子提供一个游离的3’-羟基连于内含子的5’端,第二步中外显子A的3-OH攻击外显子B的5端,从而释放出内含子,将两个外显子连接在一起.真核tRNA前体中内含子是单独成为一种内含子类型的,以酵母为例,内含子中都有一段与tRNA反密码子互补的序列,位于反密码子的3下游区,内含子没有保守序列,切除内含子的酶与tRNA前体分子的结合,依靠的是对tRNA前体分子的二级结构特征的识别,而不是对内含子一级序列特征的识别.切除内含子的过程首先是底物的识别和切割,不需要能量,由一个特殊的核酸内切酶对tRNA前体中的内含子的两端进行切割,将内含子切除.然后是连接反应,在酵母和植物中,环状磷基团在环化磷酸三酯酶的作用下打开,形成的产物具有2’-磷酸基团和3’羟基,最后在ATP存在下,连接酶将两个tRNA半分子连接在一起.对于哺乳动物,连接酶可将RNA的2’,3’-环磷酸基直接与5’-羟基末端相连,形成正常的5‘3’磷酸二酯键,而不是产生额外的2磷酸基团.8.Featuresofintronsineukaryoticpre-mRNAandhowtoremovethem?真核前体mRNA中内含子的特点,怎样移除他们?答:mRNA前体中的内含子绝大多数是GU-AG形式的内含子,它们只靠自身序列是不能进行RNA剪接的,他是在剪接体的催化帮助下完成RNA剪接过程的.在他的5剪接位点含有保守的GU序列,在他的3剪接位点含有保守的AG序列.切除内含子的过程分三部分,第一阶段是内含子的5’端切开,形成游离的左侧外显子和右侧的内含子-外显子分子,形成套索结构.第二阶段是3端剪接位点被切断然后以套索形式释放.第三阶段是右侧的外显子和左侧的外显子连接在一起.9.RolesofsubunitsofprokaryoticRNApol?原核RNA聚合酶亚基的作用?答:α亚基是装备核心酶所必须的,在启动子识别中起到一定的作用.还在RNA聚合酶与其他调控因子的相互作用中发挥作用.β’亚基是RNA聚合酶中最多的亚基,它的功能是与DNA相结合.β亚基的功能则与NTP结合,并具有催化聚合反应的活性.β’和β共同形成RNA合成的活性中心.σ因子可以识别启动子.ω亚基的功能是促进RNA聚合酶的组装.10.RolesofCTPofRNApolIIinRNAtranscriptionandprocessing?RNA聚合酶IICTD在RNA转录和加工的作用答:CTD是RNA聚合酶2最大的亚
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