colo205的转染问题有人养过colo205吗?我要做shRNA方面的研究,想通过脂质体把shRNA转到colo205中,但是由于它是半悬浮细胞,我对转染效率以及转染后的筛选不知道怎么弄有人做过这方面的实验吗?一|其它问答-问答网

colo205的转染问题有人养过colo205吗?我要做shRNA方面的研究,想通过脂质体把shRNA转到colo205中,但是由于它是半悬浮细胞,我对转染效率以及转染后的筛选不知道怎么弄有人做过这方面的实验吗?一

5人问答

更新时间:2024-04-20 12:40:10

问题描述：

colo205的转染问题

有人养过colo205吗?我要做shRNA方面的研究,想通过脂质体把shRNA转到colo205中,但是由于它是半悬浮细胞,我对转染效率以及转染后的筛选不知道怎么弄

有人做过这方面的实验吗?一直养的是贴壁细胞,第一次接触半悬浮细胞,很是头疼啊,希望有人帮我解答下,

刘玉琼回答：

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　　把siRNA带个荧光标记,然后细胞内源表达另一种颜色的荧光蛋白,这样就可以统计转染效率了,筛选也可以通过这样的荧光来区分

黄昀回答：

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　　可是我们这没有荧光显微镜啊，我们的shRNA是用药物进行筛选，做贴壁细胞时筛选很方便，可是半悬浮细胞就搞不定了

刘玉琼回答：

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　　没啥区别吧你只要验证过了shRNA能转染进去细胞不就行了药物处理之后是要看细胞形态还是要检测mRNA蛋白啥的既然你们没有荧光显微镜肯定不是做免疫荧光了吧做检测的话直接离下来就好啦你得把你们要做的说清楚点我才好给你出出主意嘛

黄昀回答：

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　　看细胞形态初步筛选，然后选择克隆进行qPCR检测

刘玉琼回答：

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　　看形态的话那就别拿这种不贴壁的细胞啦结肠癌的细胞系那么多为啥非要拿这个这根本不会有形态上的差别的都是球的

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