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欲以野生型大肠杆菌为出发菌株通过诱变筛选一株氨基酸营养缺陷型突变株,请设计实验方案并简要陈述理由.啥也不说了.
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更新时间:2024-03-29 06:10:30
问题描述:

欲以野生型大肠杆菌为出发菌株通过诱变筛选一株氨基酸营养缺陷型突变株,请设计实验方案并简要陈述理由.

啥也不说了.

关仲回答:
  我的见解如下:   1.先要获得野生型大肠杆菌的纯培养物   2.诱变:可以选择各种诱变法,如紫外线诱变法,将一定浓度的菌液(可分成好几等分分别做实验)放在一定强度的紫外灯下照射,那分成的几等分可以分别照射10S,20S,30S,40S,50S,60S,注意,菌液不可太稀太浓,这个操作应该在黑暗的条件下进行,只允许有紫外光,以免光修复造成突变失败.   3.培养:将上述菌种分别涂抹在配好的完全培养基上(牛肉膏-蛋白胨培养基),倒置培养过夜   4,筛选:配置好基本培养基,再往上面添加一定浓度的氨基酸营养液,除了不要添加你说要得到的营养缺陷的那种氨基酸,必需氨基酸都要添加,再用影印法将3中的菌落印到这些培养基上,倒置培养过夜.   5.挑取:直接挑取4中培养基上的菌落,就是你要找的氨基酸营养缺陷突变菌株   在2中,之所以要分成好几份做,再以不同时间长短去照射,是为了加大筛选的效率时间过短,可能得不到想要的突变菌种,而时间过长,菌株全死,也得不到想要的菌株,所以这样做也可以算是一个试验性的步骤!
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