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MS固体培养基的制作流程
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更新时间:2024-04-25 21:20:19
问题描述:

MS固体培养基的制作流程

罗成汉回答:
  一、实验所需的仪器设备和用具.   二、实验安排与要求:将全班若干小组(6-7人),每小组配制500mlMS固体培养基,   三、边示范边讲解实验方法和步骤   1、计算并填写培养基成分单   计算公式:∨母液=∨配制÷母液倍数   ∨激素=∨配制×培养基中所要求的激素浓度÷激素母液浓度   2.每组取500ml的烧杯一只,加300ml蒸馏水,用天平称4g琼脂放入蒸馏水中,在电炉上加热溶解.称15g蔗糖放入溶解的琼脂中.   3.按配方取出各种母液,放入到溶解后的琼脂和蔗糖溶液中,用玻璃棒搅动混合,并加蒸馏水定容至500ml.   4.用1mol/L的NaOH或1mol/LHCL将PH值调至5.8,可用PH精密试纸或酸度计测定.   5.用培养基分装用具将500ml的培养基分注于15个所选用的培养瓶中.   6.用封口膜、棉塞或其它封口物包扎瓶口,并做好标记.   7.把分装好的培养基及所需灭菌的各种用具、蒸馏水等,放入高压灭菌锅的消毒桶内,将外层锅内加水至水位线.盖好锅盖,上好螺丝,接通电源升温.待锅内温度达100.C(0.05kgf/cm2或0.005MPa)左右时,打开排气阀排净锅内冷空气,然后关闭排气阀,继续加热至温度达到121.C(1.05kgf/cm2或0.103MPa)时,维持20~30min即可切断电源,让锅内气压自然下降,当压力降到零点后,打开排气阀,排出剩余蒸汽,再打开锅盖取出培养基及灭菌物品.   8.培养基及灭菌物品在室温下自然冷却后,存放于阴凉干燥洁净处待用.   四、总结高压蒸汽灭菌的原理和一般操作步骤实验
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