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【(10分)普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因(GhMnaA2),能在纤维细胞中特异性表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解,棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种,科研人员构建了反义Gh】
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更新时间:2024-03-19 17:38:22
问题描述:

(10分)普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因(GhMnaA2),能在纤维细胞中特异性表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解,棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种,科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体,利用农杆菌转化法导入棉花细胞,成功获得转基因棉花品种,具体过程如下。请分析回答:

(1)①和②过程中所用的限制性内切酶分别是    、    。

(2)基因表达载体除了图示组成外,还应有终止子和    。

(3)③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四种长度的DNA片段,则用NotⅠ酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是    和    。

(4)④过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中,在    溶液环境中用    酶来制备原生质体。转化后的细胞再通过    形成植物体。

(5)导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对,从而抑制基因的表达,其意义是    。

 

董学平回答:
  (1)HindⅢ、BamHⅠ  SmaⅠ (2)标记基因 (3)6.0kb 12.7kb (4)甘露醇(或较高渗透压)纤维素酶和果胶酶(2分)植物组织培养 (5)阻止β-甘露糖苷酶合成,使棉纤维更长
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