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高中生物常用的实验方法有哪些?
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更新时间:2024-03-28 22:06:04
问题描述:

高中生物常用的实验方法有哪些?

李坦回答:
  1.实验方法   实验方法是整个实验设计的精髓,是做好实验设计的关键所在.现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下:   (1)化学物质的检测方法:   ①淀粉——碘液   ②还原糖——斐林试剂、班氏试剂   ③CO2——Ca(OH)2溶液或酸碱指示剂   ④乳酸——pH试纸   ⑤O2——余烬复燃   ⑥无O2——火焰熄灭   ⑦蛋白质——双缩脲试剂   ⑧染色体——龙胆紫、醋酸洋红溶液   ⑨DNA——二苯胺试剂   ⑩脂肪——苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液   (2)实验结果的显示方法:   ①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量   ②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量   ③原子途径——放射性同位素示踪法   ④细胞液浓度大小——质壁分离   ⑤细胞是否死亡——质壁分离   ⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量,发育速度等   ⑦生长激素作用——生长速度(体重变化,身高变化)   ⑧胰岛素作用——动物活动状态   ⑨菌量——菌落数或亚甲基蓝溶液褪色程度   ⑩大肠杆菌——伊红—美蓝琼脂培养基   (3)实验条件的控制方法:   ①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物   ②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水   ③除去容器中CO2——NaOH溶液   ④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境   ⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热   ⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光   ⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光   ⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠   ⑨线粒体提取——细胞匀浆离心   ⑩骨的脱钙——盐酸溶液   ⑾灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌,对不同材料,灭菌方法不同:培养基用高压蒸气灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂洗净,擦干后用75%酒精消毒;整个接种过程都在实验室无菌区进行.   (4)实验中控制温度的方法:   ①还原糖鉴定:水浴煮沸加热   ②酶促反应:水浴保温   ③用酒精溶解叶中的叶绿素:酒精要隔水加热   ④DNA的鉴定:水浴煮沸加热   ⑤细胞和组织培养以及微生物培养:恒温培养   2.斐林试剂、班氏试剂与尿糖试纸   这三种物质均可用来检验含醛基的有机物的存在,在医学上用来检验糖尿病,其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化,但成分略有不同:   斐林试剂:即硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠组成的蓝色混合溶液.分为斐林试剂A和斐林试剂B,A为CuSO4溶液,B为氢氧化钠和酒石酸钾钠的混合溶液,使用时将A、B等体积混合即成斐林试剂.   班氏试剂:即硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠组成的混合液,又叫本尼迪克特(Benedict)试剂,它与醛反应的结果是与斐林试剂一致的,只是比斐林试剂更稳定,所以在临床化验中更常使用.   尿糖试纸:又叫硫酸铜试纸,呈白色,带蓝色斑点,用于糖尿病患者的尿糖测试.每片含硫酸铜20毫克,枸橼酸300毫克,碳酸钠80毫克,氢氧化钠235毫克.尿糖试纸法快速、方便,试纸的正确使用方法为:将试纸条放在尿液中浸湿,一秒钟后取出,在一分钟内观察试纸的颜色,并与标准色板对照,根据不同的颜色来确定尿糖阳性的程度.   3.斐林试剂和双缩脲试剂的比较   相同点:①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成;   ②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mLNaOH溶液.   不同点:①CuSO4溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为0.05g/mLCuSO4溶液,   双缩脲试剂B为0.01g/mLCuSO4溶液.   ②配制比例不一样.   ③使用方法不一样:斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用,   双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B.   ④鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质.   ⑤反应本质及颜色反应不一样.   4.苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液的比较   都是用来鉴定脂肪.苏丹Ⅳ染液更易溶于脂肪,所以染色更深,同时要求染色时间更短.   生物学中常用的试剂:   1、斐林试剂:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.05g/mlCuSO4(乙液).用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色.   2、班氏糖定性试剂:为蓝色溶液.和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀.用于尿糖的测定.   3、双缩脲试剂:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.01g/mlCuSO4(乙液).用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀.如待测中存在蛋白质,则呈现紫色.   4、苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀.用于检测脂肪.可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色).   5、二苯胺:用于鉴定DNA.DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色.   6、甲基绿:用于鉴定DNA.DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色.(甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色.)   7、50%的酒精溶液:在脂肪鉴定中,用苏丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色.   8、75%的酒精溶液:用于杀菌消毒,75%的酒精能渗入细胞内,使蛋白质凝固变性.低于这个浓度,酒精的渗透脱水作用减弱,杀菌力不强;而高于这个浓度,则会使细菌表面蛋白质迅速脱水,凝固成膜,妨碍酒精透入,削弱杀菌能力.75%的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等.   9、95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA.   10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖.   11、龙胆紫溶液:(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色体着色,可将染色体染成紫色,通常染色3~5分钟.(也可以用醋酸洋红染色)   12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率.(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)
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