双向电泳第二步SDS-PAGE跑胶的问题
主要有2个问题:
第一:跑出来的胶有很多的横着竖着的条带,不知道是蛋白没有分开还是怎么的.看Bio-Rad上面写的问题分析说可能是蛋白被污染了,所以加了DNAseI和RNaseA在最开始的蛋白里面,不过效果还是不好,依然有很多条带.
第二:把第一条strip放在成品胶(SDS-PAGE的那个胶)顶部,用琼脂(agarose)凝固了2个小时,然后再跑SDS-PAGE.跑前这块成品胶都好好的,但是跑完胶(2个小时)以后,成品胶就连同上面的strip一起被挤出了原来的槽子.有朋友说可能是跑胶的时候温度太高,让胶胀大了.我就把胶放在4度的冷冻室里面跑,但是成品胶还是被挤出来了,这样会影响从strip里面转到成品胶的蛋白量.
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