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某生物兴趣小组开展探究实验,课题是“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”.实验材料、用具:菌种和无菌培养液、试管、血球计数板(计数室为1mm×1mm方格,由400个小格组
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更新时间:2024-04-23 19:00:19
问题描述:

某生物兴趣小组开展探究实验,课题是“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”.

实验材料、用具:菌种和无菌培养液、试管、血球计数板 (计数室为1mm×1mm方格,由400个小格组成)、滴管、无菌水、台盼蓝染液(对活细胞无染色效果)、显微镜等.

酵母菌的显微计数方法:

①血球计数板:是带有微小方格刻度的玻璃片,用于在显微镜下对微生物的计数.

②将含有酵母菌的培养液滴在计数板上,计数一个方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数.连续观察7d,并记录每天的数值.

根据以上叙述回答下列问题:

(1)本实验没有另设对照实验,原因是___.该实验___(填“需要”或“不需要”) 重复实验,原因是___.

(2)在吸取培养液计数前,要轻轻震荡几次试管,原因是___.如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取的措施是___.

(3)某同学第5天在使用血球计数板计数时做法如下:

①振荡摇匀试管,取1mL培养液并适当稀释(稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液).

②先将___放在计数室上,用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸(吸水纸)吸去,制作好临时装片.

③显微镜下观察计数:在观察计数时只计___(填“被”或“不被”)染成蓝色的酵母菌.在用血球计数板对某一稀释10倍样品进行计数时,发现在一个小方格内(盖玻片下的培养液厚度为0.1mm)酵母菌平均数为5,据此估算10mL培养液中有酵母菌___个.

高智杰回答:
  (1)本实验没有另设对照实验,原因是该实验在时间上形成前后对照.该实验需要重复实验,原因是避免实验偶然性带来的误差.   (2)在吸取培养液计数前,要轻轻震荡几次试管,使酵母菌分布均匀.如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当稀释含有酵母菌的培养液.   (3)②先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸(吸水纸)吸去,制作好临时装片.   ③已知血球计数板的大方格为1mm×1mm,若盖玻片下经稀释10倍的培养液厚度为0.1mm,计数时一个小方格观察值为5,则10mL培养液中酵母菌的总数=一个小方格观察值÷1个小方格容积×稀释倍数×溶液体积=5÷(1mm×1mm×0.1mm÷400×10-3)×10×10=2×109个.   故答案为:   (1)该实验在时间上形成前后对照   需要  避免实验偶然性带来的误差(或其他合理答案)   (2)使酵母菌分布均匀      稀释含有酵母菌的培养液   (3)②盖玻片   ③不被      2×109
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